实验方法
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CRISPR质粒区别
PX330; SpCas9 and single guide RNA PX458; SpCas9-2A-EGFP and single guide RNA PX459; SpCas9-2A-Puro and single guide RNA…
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如何设计质粒载体
设计质粒载体是一项复杂而有趣的任务，通常需要考虑到载体的用途、宿主细胞类型、表达水平、选用的启动子、标签等多个因素。以下是设计质粒载体的一些建议步骤： 明确研究目的： 定义质粒的主要用途，是用于表达蛋白质、RNA干扰、基因编辑等。 确定宿主…
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常用通用测序引物名称和序列
本文列出一代测序常用的通用引物，一般由测序公司免费提供。 引物名称 引物序列 27F AGAGTTTGATCMTGGCTCAG 1492R GGTTACCTTGTTACGACTT 86F GCTCAGTAACACGTGG 1340R CGG…
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实验兔的解剖学特征和生理学特性
兔（Rabbit）是 哺乳类 兔形目 兔科 下属所有的属的总称。 生物学 分类动物界 脊索动物门 脊椎动物亚门 哺乳纲 兔形目 。 1、一般特性及生活习性 家兔虽然经人类长期的驯化和培育已成为一种常用的实验动物，但仍然继承了其祖先野生穴兔的…
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ED50，Ki50，IC50，Kd50和pIC50的定义和区别
EC50值:药物达到最大临床功效(有时是抑制或刺激效果)50%时的浓度。这是一个药用术语。 ED50值:50%的个体表现特定药效时药物的有效剂量(而非浓度)。IC50值: 达到50%抑制效果时抑制剂的浓度。Ki50值: 检测到50%抑制效果…
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FACS：细胞染色背景高、特异性低如何处理
如何固定和渗透细胞（小鼠和人类）以进行特异性细胞内染色： 1： 我们常规使用的一种廉价而有效的方法是用 10%缓冲福尔马林溶液在 4°C 下固定 15-30 分钟，然后用 TBST（0.2% TritonX-100）在室温下透化细胞 20 …
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FACS：单细胞分选后如何提高单细胞活率
主要有三个方面需要考虑。一是分离/纯化/分拣步骤中的方法、温度和缓冲液。如果细胞是从组织中分离出来的，最佳的时间、酶解和/或机械方法可能有助于更好地保持细胞活力。温度也很关键，因此在分离/纯化/分拣步骤中始终将细胞保持在 4°C 或冰上有助…
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FACS：评价样本固定和样品细胞通透不充分的指标
一般来说，当流式细胞仪检测到的信号暗淡/微弱或大部分停留在阴性对照（无荧光信号）时，说明样品固定和/或通透性不足。具体来说，如果您要寻找的细胞内蛋白质的表达水平是一个变量，您应该能看到一个明显的阳性峰/信号，并与阴性对照分开。如果您感兴趣的…
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错误使用的实验动物麻醉方法导致拒稿
近期有一项报道，国内一位科研人员向《Scientific Reports》投稿遭拒，原因是该项研究在动物实验过程中，使用水合氯醛麻醉，而该物质作为麻醉剂，更应该是镇静剂，使用时其镇痛效果较差，并且有导致腹膜炎等的副作用，实验过程对动物不人道…
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原代NK细胞分离培养方法和试剂组份
PBMCs were isolated from buffy coats using Lymphocyte Separation Medium (Corning). Human blood related work has been app…
