实验方法
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CUT&Tag and CUT&RUN
CUT&Tag: An Introduction CUT&RUN, Cleavage Under Targets & Tagmentation (CUT&Tag) is a faster, more cos…
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CUT&Tag技术和原理
CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)技术是一种用于细致地研究蛋白质与DNA相互作用的方法,特别适用于研究转录因子、组蛋白修饰等蛋白质在基因组上的精确结合位置。许多染色质特征…
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免疫荧光细胞化学染色方法
免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗…
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荧光原位杂交技术原理及操作步骤
1974年Evans首次将染色体显带技术和染色体原位杂交联合应用,提高了定位的准确性。20世纪70年代后期人们开始探讨荧光标记的原位杂交,即FISH技术。1981年Harper成功地将单拷贝的DNA序列定位到G显带标本上,标志着染色体定位…
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免疫组化常见问题的处理
免疫组化常见问题的处理
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免疫组化非特异性染色的消除方法
免疫组化非特异性染色的消除方法 一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点:(1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。(2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧…
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免疫组化技术规范
病理科医生要有相当的免疫组化诊断知识和免疫组化技术经验,要清楚认识免疫组化技术是一门实验性、技术性非常强的技术,要多了解多种抗体在组织中的表达情况,以及影响免疫组化结果的各种因素,只有提高医生的免疫组化诊断水平才能避免错误的判断,才能确保免疫组化诊断的准确性。病理技术人员是免疫组化实验成功的关键因素,操作人员要有丰富的免疫组化的理论知识及熟练的免疫组化染色技术,十分清楚每一个步骤的应用原理,使实验结果更具可靠性。可靠的实验试剂和实验方法是每个实验室的必备条件。由于实验方法多种多样,抗体的品种繁多,每个实验室都应当确保高质量高效价的试剂,并摸索出最佳的实验条件。优质的免疫组化取决于有效的抗原修复、敏感的检测系统、合适的实验质控对照及熟练和有责任心的技术人员。
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Kozak序列的功能和应用
Kozak 序列是在真核生物的mRNA中共有的(gcc)gccRccAUGG序列 。它在翻译过程的启动中扮演了重要角色。 Kozak 序列通常被认为是 GCCGCCACCATGG,其中 ATG 是起始密码子(通常是信号序列的起始)。建议使用…
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常用疼痛动物模型
神经病理性疼痛模型 1. 皮质和丘脑痛模型造模方法:通过向躯体感觉皮质或丘脑核团微量注射兴奋性毒性物质(如苦味毒素或红藻氨酸)诱导疼痛。直接在丘脑注射IV型胶原常用于模拟出血性脑卒中。该模型可导致机械和热痛敏,伴随自发疼痛行为,如抬举、摇动…
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Transwell孔径0.4um3um8um选择原则
在实验中使用Transwell®通透性支持物时选择合适的孔径也是十分重要的。常用最小孔径的Tanswell膜(0.4um )主要应用于药物转导研究。细胞侵袭,趋化性和运动性研究通常采用3.0um或以上的孔径的Tranwell膜。 细胞从膜的…