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  • 荧光原位杂交技术FISH

    概述: 原位杂交技术是以核酸分子碱基互补配对的原理为基础的实验技术。通过标记的核酸分子(探针,Probe)与目标核酸分子杂交,再用相应的方法检测探针的存在,从而揭示靶部位目标分子的位置。最早的原位杂交技术出现于 1969 年,Gall 和 …

    03/30/2020
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  • RNA-蛋白互作:Pull-Down实验

    概述: 此方法是利用脱硫生物素末端标记的 RNA 和链霉亲和素磁珠标记的来高效富集RNA 结合蛋白(RBP)。RNA-蛋白Pull-Down的原理是将RNA与链霉亲和素磁珠结合。之后在蛋白质-RNA结合缓冲液中平衡RNA结合的磁珠,再加入蛋…

    03/30/2020
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  • 染色质免疫共沉淀技术ChIP实验原理和方法

    染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) 概述: 真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。因此,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫…

    03/26/2020
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  • RACE技术原理和方法

    RACE技术 概述: 近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的…

    03/26/2020
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  • DNase I超敏感位点的定位研究原理和方法

    DNase I超敏感位点的定位研究 概述: 早在20世纪80年代初期,研究人员发现染色质对脱氧核糖核酸酶I(DNase I)的敏感性与基因的转录有关,即当一个基因处于转录活性状态时,含有这个基因的染色质区域对DNase I降解的敏感性要比无…

    03/26/2020
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  • Real time实时定量PCR实验原理和方法

    概述: Real-Time PCR 技术,又称实时定量荧光PCR(real-time quantitative PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行总量分析或通…

    03/26/2020
    384
  • 国家自然科学基金万能模板

    报告正文 (一)立项依据与研究内容 1、项目的立项依据 XXX疾病及其研究进展 XXXX疾病(XXXXXX,XXX英文名称)是XXX系统(消化、呼吸、神经等等)常见的一种疾病类型,多数是由于XXXX出现功能紊乱以及XXXX功能失调等所诱发,…

    03/26/2020
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  • 实验方法总结(4):组织水平部分

    1、免疫组化 1.1 SP法 单克隆抗体MMP-2、MMP-9,SP试剂盒购自ZYMED公司(1 100)。3%H2O2封闭内源性过氧化物酶,微波加热抗原修复, 10%正常羊血清孵育,滴加一抗, 4℃冰箱中过夜, PBS缓冲液(Na2HPO…

    03/24/2020
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  • 实验方法总结(3):动物模型部分

    从肿瘤起源分,肿瘤动物模型的分类如下: 从研究目的来分,可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析: 1、研究肿瘤细胞增殖 细胞准备:GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为:空白对照组、阴性对照组、实验组。 取Balb/c裸鼠,雄性…

    03/24/2020
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  • 实验方法总结(2):细胞生物学部分

    1.    原代细胞分离与培养 1.1原代细胞分离 人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,必须将现有的组织块充分散开,使细胞解离出来。 悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的…

    03/24/2020
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